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辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B操作步驟和注意事項
點擊次數:2563 更新時間:2018-03-15

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辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B參數說明

中文名:辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B

英文名:octyl -Sepharose CL-4B

供應商:上海遠慕

凝膠類型:疏水層析填料

粒徑: 45-165μm

工作PH值:3-12

操作溫度:4-40℃

結構成分:4%交聯瓊脂糖

包裝:25毫升/瓶,100毫升/瓶,大包裝

配基偶聯量:40μmol phenyl/ml 凝膠

保存條件:4℃

性狀:白色微球,凝膠狀,保存在20%酒精溶液中

應用:疏水層析介質,適合含芳香族配體蛋白純化,特別適合單抗的純化等。

辛基-瓊脂糖凝膠 H.P.操作步驟和注意事項

辛基-瓊脂糖凝膠 H.P.說明

 

辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B操作步驟

1.乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;

3.鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性;

4.將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內產生氣泡或斷層;

5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);

6.凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可;

7.洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;

8.在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B操作注意事項

1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。

2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。

3、在實驗過程中,請嚴格遵循產品說明書上的要求進行操作。

4、本產品避免與氧化劑接觸;避免長時間暴露在空氣中。

5、保質期:5年。

 

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