1) 觀察染色的干玻片時(shí)經(jīng)常遇到的問題大多是因?qū)η捌诘娜旧粔蚣?xì)心所造成 的。操作時(shí)應(yīng)使用適當(dāng)濃度的細(xì)菌懸液，在載玻片上涂一層薄的均勻的細(xì)菌涂壇。如果 涂層太厚或密度分布不均勻，很難觀察和得出結(jié)果。革蘭氏染色的脫色和復(fù)染操作少驟 也要特別小心，

(2) 如果目鏡前端較臟，會(huì)使影像的清晰度和對比度受到影響，好像是透過一層薄物 觀察細(xì)菌。這多是由于使用油鏡后沒及時(shí)將油擦下凈，鏡油逐漸在鏡頭表面硬化造成 的。這時(shí)需要用鏡頭紙沾上二甲苯將其除去。但要注意不能經(jīng)常使用二甲苯，否則會(huì)降 低鏡頭密封膠的作用。鏡油如果長期不擦，會(huì)滲透到鏡頭里面污染物鏡，這時(shí)，惟一的解 決辦法只能是更換目鏡。

(3)目鏡和聚光鏡上有污垢時(shí)，會(huì)有微粒出現(xiàn)在視野中。只需在觀察玻片時(shí)旋轉(zhuǎn)目 鏡就能證明目鏡是否干凈。而當(dāng)聚光鏡上有污垢時(shí)，調(diào)節(jié)焦距，污點(diǎn)會(huì)變得清晰或模糊。用鏡頭紙小心除去這些污詬和塵土。有時(shí)塵污會(huì)堆枳到目鏡內(nèi)部的鏡片表面，但目鏡相 對較容易裝卸,可以用吹吸球(從照相器材店購買)吹掉鏡筒中的塵土。

(4) 有時(shí)，還需要檢查物鏡，看其是否能夠正確定位。

(5) 所使用的載玻片和蓋玻片的厚度要合適(可查閱顯微鏡生產(chǎn)廠的儀器說明書）c

(6) 如果視野不平衡或光線不夠亮，檢查聚光鏡的配置是否正確。鏡臺下部聚光鏡 有磨砂襯片,很容易放錯(cuò)。還要檢查聚光鏡和燈泡，確保其正常居中。

(7) 如果染色的玻片在10倍或40倍物鏡下能夠聚焦,但當(dāng)使用90倍或100倍物鏡 時(shí)不能聚焦，檢查載物臺上的玻片是否放顛倒。