封閉血清用于免疫組化（IHC）或者免疫熒光（IF）實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉，降低背景，減少假陽(yáng)性。遠(yuǎn)慕提供多種屬封閉血清，液體形式產(chǎn)品（原液），無(wú)需溶解，用PBS直接稀釋即可使用，低防腐劑含量，對(duì)細(xì)胞和蛋白的毒性/影響更小。
什么是封閉血清
封閉血清就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動(dòng)物采血，然后不加抗凝劑，血液凝固，血kuai收縮，析出的淡黃色液體。經(jīng)過(guò)特殊工藝處理后的血清，特別適在各類(lèi)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于封閉處理， 比如：IHC、IF/ICC、ELISA等。
血清與血漿的區(qū)別
血漿是指血液中除去細(xì)胞成分后剩下的淡黃色或無(wú)色半透明液體，一般需要經(jīng)過(guò)抗凝處理 。血清與血漿的區(qū)別在于血清中不含某些在凝血過(guò)程中被消耗的凝xue因子如纖維蛋白原，增添了在血液 凝固過(guò)程中由血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板所釋放的化學(xué)物質(zhì)。
正常驢血清
正常山羊血清
正常兔血清
正常大鼠血清
正常小鼠血清
特點(diǎn)：
用于免疫組化（IHC）或者免疫熒光（IF）實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉，降低背景，減少假陽(yáng)性。
液體形式產(chǎn)品（原液），無(wú)需溶解，用PBS直接稀釋即可使用，低防腐劑含量，對(duì)細(xì)胞和蛋白的毒性/影響更小。
為什么需要封閉
封閉步驟可減少一抗和二抗與非靶標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行非特異性結(jié)合時(shí)所產(chǎn)生的本底信號(hào)。理想情況是，封閉劑將占據(jù)樣本中的“黏性"位點(diǎn)，比如暴露的帶電性或疏水性蛋白表面，同時(shí)不會(huì)干擾一抗/二抗識(shí)別靶表位，從而盡可能提高信噪比(S/N)。
封閉血清效果
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn)，另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點(diǎn)，阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合，從而降低背景，減少假陽(yáng)性。對(duì)于適用多抗的實(shí)驗(yàn)，二抗種屬來(lái)源的正常血清是封閉處理的金標(biāo)準(zhǔn)。
封閉血清使用方法
推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配成5%-20%的工作液，直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。
遠(yuǎn)慕實(shí)用Tips：
最佳的稀釋比例需研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。建議的起始稀釋比例如下：IHC-p（1：10-20）；IF / ICC（1：10-20）；ELISA（1：100）。
封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白，且與一抗來(lái)源不同，可用與二抗相同來(lái)源的封閉血清。
封閉結(jié)束后，用濾紙吸去血清，不洗，直接滴加一抗。
每張切片需要量，可以參考50ul PBS + 5ul 血清 來(lái)計(jì)算。
如何如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損：
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2～8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。如果開(kāi)蓋后未使用完，我們建議存放于4℃，但請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。
